伊茂礼

血液培养即血培养，临床上对于怀疑存在细菌性菌血症、真菌性菌血症、感染性心内膜炎及临床表现为不明原因发热的相关感染患者，血培养是必不可少的微生物学的诊断手段，血培养也是病人发生血流感染诊断的金标准。 此外，血培养也可检测与血流感染相关的感染疾病，比如肺炎、化脓性关节炎、骨髓炎等。明确血流感染的病原菌及其药物敏感性，有助于降低病人的死亡率，提高医生的诊治水平，降低患者的医疗费用。

通常病人取痰液标本多采用咳痰的方法，即病人自咳。在自咳时标本会不可避免地经过病人的口腔和咽部，可被正常菌群污染。所以留取痰液标本之前，病人应该用无菌生理盐水漱口。通常建议病人多漱口几次，不要低于3次。而且漱口的时候尽量仰头漱口，这样效果更佳，也可以将咽部的定植菌去除，然后用力咳出深部的痰液。 病人应咳出深部的痰液，即感觉痰液从下呼吸道排出，切不可随意留唾液或鼻后分泌物进行痰液送检。有些病人不能够自主咳痰，如住院病人，建议护理人员用吸痰器进行吸痰并送检。

微生物学的检验需要培养48小时发出检验报告，即培养两天发出报告。但是有的细菌的培养，比如流感嗜血杆菌，可能需要48小时才能够长到肉眼可以看到的菌落；之后检验人员还要再做药敏试验，即共需72小时，因此部分病人拿到痰培养结果可需要3-4天。 痰培养是支气管炎、肺炎、肺脓肿和脓胸等下呼吸道感染病原学诊断的一种常规的实验方法，通常引起下呼吸道感染的病原菌包括社区获得性菌群，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌等。院内获得性感染即病人不是因为肺炎住院，而是在入院后发生咳嗽。导致这种情况发生的病原菌有鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌等，上述病原体通常痰培养24小时可见明显的菌落生长。

通常临床怀疑病人发生血流感染时，需要进行血培养检查，即病人有如下临床指征： 1、体温＞38℃，或者＜36℃； 2、寒战； 3、外周血白细胞数量＞10000/ml，并有明显的核左移，或者外周血白细胞数量＜4000/ml； 4、呼吸频率＞20次/分，心率＞90次/分； 5、皮肤黏膜出血、昏迷、多器官功能障碍、血压下降； 6、部分反应指标异常，如降钙素原、C反应蛋白等升高。

数据显示，血培养时成人采血量在2-4mL之间时，采血量和阳性率成正比，即采血量越多，阳性率越高；体重＜8kg的新生儿或者婴儿，通常采集一瓶，每瓶0.5-1mL；8-13kg的幼儿，通常采集一瓶，每瓶3-5mL；体重大约13kg的儿童，建议采集两瓶，每瓶5-10mL。成人通常建议采集2-3套送检，一套是2瓶，即采集4瓶或者6瓶，每瓶5-10mL。 血培养采血量较关键，是血培养能否取得阳性结果的关键因素之一。采集足够的血量，比采集时间更重要。采集时间通常在发热时、寒战时、高热时。目前实验室、大型的三甲医院有专门的仪器设备，当采血量低于5-10mL会报警，即采血量少会导致假阴性情况的发生。

临床微生物实验室常规药物敏感性试验采用的方法有微量肉汤稀释法、纸片扩散法和浓度梯度扩散法，此三种方法为现在医院实验室常用方法。常规药敏试验是指检验人员培养出细菌，做抗菌药物的敏感性试验。病原体对抗菌药物的敏感性试验，对于辅助临床医生使用抗菌药物意义重大。我国抗菌药物滥用现象严重，比如病人到药店都能买到抗生素，所以国家高度重视抗菌药物的临床合理应用。近年来下达了《“健康中国2030”规划纲要》、《遏制细菌耐药国家行动计划(2016-2020年)》等多份关于抗菌药物合理应用的文件，而做好抗菌药物合理应用的关键性工作，就是做好抗菌药物敏感性试验。检验人员做好抗菌药物敏感性试验研究，可有一手的资料，可以为临床合理应用抗菌药物提供数据支持。 检验人员检测结果以后，按照美国临床和实验室标准委员会CLSIM100最新版本的要求，选择药物和相应的方法及操作规范进行药物敏感性试验，最后形成一个较完整的报告单，发到临床。临床上有菌、有药，这样临床医生的治疗更精准、更个体。

尿液培养无细菌生长，表明病人没有发生尿路感染。但如果病人存在尿痛、尿频、尿急、血尿等临床症状，尿液常规检查显示白细胞的数量高出正常范围，表明病人还是存在尿路感染的情况。 而实验室出无细菌生长的报告，表明可能存在着常规培养不生长或者生长较缓慢的细菌，比如结核分枝杆菌、支原体等。结核分枝杆菌生长较慢，支原体常规培养不生长，通常需要其它的检测方法来进行病原学的诊断，比如尿液离心涂片，进行抗酸杆菌涂片的镜检，检验人员观察涂片中是否存在抗酸杆菌；还可以采用分子生物学的方法进行支原体检测。

大便培养检查送到检验科实验室以后，病人拿到完整的报告大约需要48小时。通常在35℃-37℃的空气环境中培养16-24小时，比如引起腹泻的常见病原体，沙门氏菌、志贺氏菌都可以有明显的菌落生长。若病人需要鉴定结果，检验科医生进行培养的第二天，即24小时后可以发出报告。 由于近年来细菌耐药率逐年增长的趋势，比如副溶血弧菌对氨苄西林、头孢唑啉、哌拉西林的耐药率较高；致病性大肠埃希菌、志贺菌对氨苄西林、复方新诺明、三代头孢及喹诺酮类药物的耐药率明显增长；沙门菌的耐药率虽然低于志贺氏菌，但是其对三代头孢的耐药率有轻微增长；其余变形杆菌耐药率不高，但是对三代头孢的耐药率稳定于20%左右；金黄色葡萄球菌对大环内酯类、喹诺酮类药物的耐药率较高。因此检验科医生培养出病原菌以后，还要对病原菌进行药物敏感性试验，通常需要16-24小时。

白带培养即阴道分泌物培养，主要是针对阴道炎做的微生物学检查。引起阴道炎的病原体较多，其中细菌比如阴道加德纳氏菌、拟杆菌、消化链球菌等。近年来发现大肠埃希菌、肠球菌为优势菌时也可以引起阴道炎，主要是阴道环境菌群失调所致。其次是淋球菌，感染淋球菌即淋病，是一种性传播疾病。念珠菌感染引起的念珠菌阴道炎，通常以白色念珠菌为主，其次为光滑念珠菌。 由于阴道加德纳菌、拟杆菌、消化链球菌的耐药性较低，因此临床医生经验用药即可，无需进行药敏试验。而其它病原体存在耐药性上升的趋势，若培养结果为阳性，应该进行药物敏感性试验，从而得到由鉴定结果和药敏结果构成的完整微生物检测报告。

通常建议取晨尿培养，其意义在于尿液在膀胱中潴留一夜，即超过六小时，为致病菌提供繁殖机会，可提高尿液培养的阳性率。 由于尿培养病原菌是一种培养技术，实验室通常接种一定量的尿液进行基础培养。培养第二天以后，检验人员根据培养平板上生长的菌落及它的数量来判断其是否是引起尿路感染的病原菌。比如检验人员设定一个阈值，当菌落数量超过此阈值，认为其有意义，是引起尿路感染的病原菌；如果低于此阈值，认为其是尿道前端的定植菌，不是致病菌。如果病人取的是随机尿液，标本当中存在的致病菌数量不够，会导致假阴性的情况。